Epoxomicin
強力なプロテアソーム選択的阻害剤 新発売！
Epoxomicin は1992年に M. Hanada らにより Actinomycete strain No.Q996-17 の醗酵培養液から抗癌作用を指標として抽出されました[J. Antibiot., 45, 1746 (1992).]。次いで1999年に L. Meng らにより強力かつ選択的なプロテアソーム阻害剤である事が見つけられました[Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 96, 10403 (1999).]。彼らの報告では、Epoxomicin はプロテアソームのサブユニットの中で LMP-7, X, Z とMECL1に非可逆的に結合しプロテアソームを選択的に阻害するが、Calpain, Papain, Chymotrypsin, Trypsin, Cathepsin B に対しては 50 mM濃度でも阻害しないことが明らかにされています。この特異性の高さは M. Groll らが X 線結晶解析で解明した阻害様式(図1)に起因していると考えられます [J. Am. Chem. Soc., 122, 1237 (2000).]。
図1 Epoxomicin によるプロテアソームの阻害様式
また、培養液に Epoxomicin, Lactacystin, Z-Leu-Leu-Leu-H (aldehyde) を加え培養細胞中の p53 の代謝阻害やユビキチン化された蛋白質の蓄積を調べる実験では、Epoxomicin は Z-Leu-Leu-Leu-H (aldehyde) とほぼ同等の作用があり、Lactacystin よりはるかに強いと報告されています[Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 96, 10403 (1999).]。
弊社で化学合成した Epoxomicin のプロテアソームに対する IC50は 9 nM 程度であり、その阻害活性の強さはZ-Leu-Leu-Leu-H (aldehyde) に匹敵し、Lactacystin よりかなり強いことが認められています(図2)。
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Inhibitor: Epoxomicin, Z-Leu-Leu-Leu-H, Lactacystin, Substrate: Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-MCA (4.4 μM) Enzyme: 20S proteasome (1.1 nM), BostonBiochem lot 5799P Buffer: 20 mM TrisHCl/0.5 mM EDTA/0.035% SDS (pH 8.0) Temp: 25℃ Total volume: 340 μL Preincubation: 10 min (Inhibitor/Enzyme) Data reading: 1 min to 50 min Em: 450 nm, Ex: 360 nm |
図2 プロテアソ－ム阻害活性の比較
ペプチド研究所のユビキチン－プロテアソーム系研究用試薬
| コード | 製品名 | 包装・容量 |
| 4381-v | Epoxomicin | 0.2 mg Vial |
関連阻害剤
| コード | 製品名 | 包装・容量 |
| 4368-v | Lactacystin | 0.2 mg Vial |
| 3207-v | Ubiquitin Aldehyde | 0.05 mg Vial |
| 3169-v | Z-Ile-Glu(OBut)Ala-Leu-H (aldehyde) [PSI] | 5 mg Vial |
| 3175-v | Z-Leu-Leu-Leu-H (aldehyde) [MG-132] | 5 mg Vial |
| 3170-v | Z-Leu-Leu-Nva-H (aldehyde) [MG-115] | 5 mg Vial |
関連基質
| コード | 製品名 | 包装・容量 |
| 3140-v | Boc-Leu-Arg-Arg-MCA | 5 mg Viaｌ |
| 3120-v | Suc-Leu-Leu-Val-Tyr-MCA | 5 mg Vial |
| 3176-v | Z-Leu-Arg-Gly-Gly-MCA | 5 mg Vial |
| 3179-v | Z-Leu-Leu-Glu-MCA | 5 mg Vial |
| 3177-v | Z-Leu-Leu-Leu-MCA | 5 mg Vial |
